生物工程实验原理与技术研究
Introduction
全书共分为分六大章节,每章节内容基本是由两个部分组成,即实验技术原理与具体的实验过程。其中,第一章主要是阐述生物工程与生物技术的基本概念、发展历程及应用价值等。第二章正式开始论述具体的生物工程技术,并对基因工程技术的实验原理及相关实验内容进行阐述,包括基因工程的克隆载体与受体系统研究、目的基因的相关研究、基因工程工具酶的研究、新型基因工程技术研究等,在实验部分主要介绍了质粒 DNA 提取、凝胶阻滞实验、大肠杆菌感受态细胞的制备和重组子的转化、PCR 扩增 DNA 的提取及变性电泳、Northern 杂交、建设基因组文库、构建 cDNA 文库及转基因技术实验。第三章主要论述蛋白质及酶工程实验原理与技术研究,涉及到实验原理及相关的实验内容,如提取生物组织总蛋白、分析蛋白质的免疫印记及酶的基本特性等。第四章则论述细胞工程的实验原理与技术研
究,主要分为两大部分,即动物细胞工程技术与的植物细胞工程技术原理及实验等。第五章研究发酵工程实验原理及技术,涉及到微生物发酵及其过程的概念、应用等。第六章简单概述其他常用的生物工程技术及实验,如功能基因的克隆技术、基因表达分析技术、双向电泳技术及 RNA 干扰技术等,涉及到的实验有溶菌酶的纯化、结晶与酶活测定;大肠杆菌碱性磷酸酶定点诱变与酶活分析;种子蛋白质含量及构成等。
需要特别说明的是,在撰写过程中,细胞工程技术部分主要参阅了《植物细胞工程》(朱至清编著,化学工业出版社,2003 年)、《细胞工程》(李志勇编著,科学出版社,2003年)、《植物细胞工程原理与技术》(周维燕主编,中国农业大学出版社,2001 年)等相关著作、教材和资料,并引用了部分相关内容。附录部分主要参阅了《生物工程技术实验指导》(魏群主编,高等教育出版社,2004)、《生化与分子生物学实验技术教程》(赵亚华等编,高等教育出版社,2005)和《基础生物化学实验指导》(吕淑霞主编,中国农业出版社,2003)等书的附录部分,并引用了部分相关内容。由于篇幅关系,在参考文献中未能将参考的众多书籍和资料全部列出,敬请谅解。
978-981-18-2243-8
第一章 生物工程实验原理与技术概况
第一节 生物工程及生物技术概念
一、生物工程
二、生物技术
第二节 生物工程的发展历程
第三节 生物技术的应用价值及发展前景
一、生物技术的应用价值
二、生物技术应用的发展前景
第二章 基因工程技术实验原理及应用
第一节 基因工程技术概述
一、基因工程的克隆载体与受体系统研究
二、目的基因的相关研究
三、基因工程工具酶的研究
四、新型基因工程技术研究
第二节 基因工程的相关实验
一、质粒 DNA 提取
二、核酸的定量、纯度测定及电泳分析
三、DNA 片段酶切
四、凝胶中 DNA 的回收及 DNA 的体外连接
五、重组转化子的快速鉴定
六、凝胶阻滞实验
七、大肠杆菌感受态细胞的制备和重组子的转化
八、PCR 扩增 DNA 特异性片段
九、植物组织总 RNA 的提取及变性电泳
十、Northern 杂交
十一、建设基因组文库
十二、构建 cDNA 文库
十三、转基因技术实验
十四、DNA 片段的体外连接
第三章 蛋白质及酶工程实验原理与技术研究
第一节 蛋白质及酶工程实验原理
一、蛋白质及酶工程的简介及原理
二、蛋白质及酶工程的具体应用
第二节 蛋白质及酶工程的相关实验
一、提取生物组织总蛋白
二、分析蛋白质的免疫印记
三、酶的基本特性
四、蛋白质含量测定
五、蛋白质亚基分子量
六、蛋白质结晶
七、绿色荧光蛋白定点突变
八、小肽的氨基酸序列测定
第四章 细胞工程实验原理与技术研究
第一节 细胞工程技术原理
一、动物细胞工程技术
二、植物细胞工程技术
第二节 细胞工程实验
一、动物细胞工程技术实验
二、植物细胞工程技术实验
第五章 发酵工程实验原理与技术研究
第一节 微生物发酵
一、概念
二、实例介绍
三、应用领域
第二节 发酵过程
一、概念
二、内容概述
三、应用领域
第六章 其他常用的生物工程技术
第一节 生物工程技术
一、功能基因的克隆技术
二、基因表达分析技术
三、RNA 干扰技术
四、双向电泳技术
五、毛细管电泳技术
六、酵母双杂交技术
第二节 综合设计实验
一、溶菌酶的纯化、结晶与酶活测定
二、大肠杆菌碱性磷酸酶定点诱变与酶活分析
三、种子蛋白质含量及构成
四、分离纯化与鉴定植物蛋白酶
五、绿色荧光蛋白的原核表达、纯化及鉴定
结论
参考文献
Author(s) Information
刘琼(1980-),2020 年毕业于吉林农业大学,博士研究生,实验师。主要从事动物微生态制剂与黏膜免疫方面的研究工作,在乳酸菌表达载体系统构建及新功能型乳酸菌分子免疫机制等方面取得了一系列创新性成果。主持吉林省科技发展计划项目专项 1 项,吉林省教育厅科学技术研究项目 1 项,参加国家自然基金项目 3 项,发表 SCI 论文 4 篇。
杨丽丽(1979-),2007 年毕业于吉林农业大学,硕士研究生,讲师。主要从事食品中有效营养成分的作用机制、食源性致病菌检测、食源性疾病快速检测试剂开发等领域的科研工作。主持吉林省教育厅科研项目一项,主要参与吉林省教育厅科研项目三项。
王贵珍,女,食品科学与工程专业博士研究生,致力于抗病原菌感染新型先导化合物和先导药物的开发,尤其是抗食源性病原菌感染的控制,在 frontiers in microbiology、life science、BMC microbiology 等学术刊物上发表 SCI 论文近 20 余篇。主讲《食品质量安全管理学》,《食品企业质量管理课程设计》,《食品安全储藏学》等课程。